问题描述：
感觉整个过程没有什么操作错误的地方，PCR检测后切胶回收也有带，低温连接过夜 转化挑取24个克隆用载体引物和特异引物筛选 都没有结果 目的带2K左右 而是大部分的载体自连 在200bp
问题解答：
问你们导师啊 我没在做怎么知道是怎么回事 引物加错了？ taq加错了？
是不是酶量过少？？转化时间又过长？
可能是你的目的片断与载体连接时，某个酶切位点没有切开，可能是那个酶失活了，导致黏性末端没露出来，无法酶联。也可能是酶切时buffer选取不当，酶活不行。
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