什么是放射自显影技术?

发布时间:2024-05-19 15:16 发布:上海旅游网

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放射自显影术(radioautography;autoradiography)用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。其原理是将放射性同位素(如14C和3H)标记的化合物导入生物体内,经过一段时间后,将标本制成切片或涂片,涂上卤化银乳胶,经一定时间的放射性曝光,组织中的放射性即可使乳胶感光。然后经过显影、定影处理显示还原的黑色银颗粒,即可得知标本中标记物的准确位置和数量,放射自显影的切片还可再用染料染色,这样便可在显微镜下对标记上放射性的化合物进行定位或相对定量测定。

这种技术与电镜样品处理,则为电镜放射自显影。

由于有机大分子均含有碳、氢原子,故实验室一般常选用14C和3H标记。14C和3H均为弱放射性同位素,半衰期长,14C为5730年,3H为12.5年。一般常用3H胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TDR)来显示DNA,用3H尿嘧啶核苷(3H-UDR)显示RNA;用3H氨基酸研究蛋白质,研究多糖则用3H甘露糖、3H岩藻糖等。

免疫放射自显影术(autoradiograph)是一种基本的组织学研究方法,基本原理是使用放射性物质。旨在追踪某些物质在体内、组织或细胞中的分布与代谢径路。首先,将放射性同位素或放射性同位素的标记物注入动物体内或加入培养基中,间隔一定时间取材,制成标本(如切片),在暗室中于标本的上面涂以液体原子核乳胶,置暗处曝光,数日后再经显影和定影处理,或经染色后光镜观察,在放射性同位素或其标记物存在的部位,溴化银被还原成黑色的微细银颗粒,也可在电镜下观察则称之为电镜放射自显影术(electron microscope autoradiography)由此,可获知被检物质在机体、组织与细胞内的分布、数量及代谢径路。
在生物学、组织学研究中,常用的放射性同位素主要是能量低、射程短、电离作用强β的射线如3H,14C,32P,35S,125I,45Ca,等或其它化合物。例如将125I注入体内可观察碘在甲状腺内的碘化部位及过程;又如把3H标记的胸腺嘧啶苷或氨基酸注入体内,可以研究细胞内DNA合成及蛋白质合成及其代谢过程。还可对标本中银颗粒数目进行定量分析;也可用液体闪烁计数器对细胞或匀浆的放射强度进行定量研究。

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