怎样防止目的基因和载体的自连

问题描述：

问题解答：

怎样防止目的基因和载体的自连??????
这是什么话？目的基因本来就要和载体连呀！
你是不是说怎么样防止目的基因自连或载体自连？
这个比较简单，让二者的黏性末端尽量长一些撒．
再说了，基因或者载体自连的可能性比较小，因为要使二者各自两端能互补，其概率一般是非常小的．

如果用单酶切，防止载体自连，可以用碱性磷酸单酯酶处理载体，而目的基因不作处理。也可以使用不同的酶进行酶切，就不会出现自连问题了。

补充一下，如果是用T载体连接的话，让基因片段的数量为载体的2～10倍，可以有效降低T载自连的概率。
防止是做不到的

用碱性磷酸酶处理，他可以使5'端的磷酸集团转化为羟基，这样就阻止了基因或载体自身5’端的磷酸基团和3’端的羟基集合形成磷酸二酯键，从而防止自连